類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎 (RA) 是一種慢性滑膜炎，其特征是關(guān)節發(fā)炎、滑膜關(guān)節損傷和隨時(shí)間惡化的殘疾。引發(fā)和促進(jìn)RA進(jìn)展的基本致病機制可能是由于免疫穩態(tài)失衡導致的全身和滑膜炎癥，可能涉及遺傳和環(huán)境因素。

在BeSt研究中，508名RA患者接受了激素、疾病緩解抗風(fēng)濕藥 (DMARD) 或生物制劑的治療，并接受了長(cháng)達5年的隨訪(fǎng)；根據研究結果，超過(guò)50%的RA患者在治療后未達到臨床緩解。因此，盡管醫學(xué)取得了巨大進(jìn)步，但仍存在以下問(wèn)題：

1、一些患者不能耐受DMARD或生物制劑；

2、 生物制劑價(jià)格昂貴，會(huì )削弱免疫系統，從而可能增加感染的風(fēng)險。因此，迫切需要RA患者的新治療選擇。

間充質(zhì)干細胞 (MSC) 是源自骨髓或其他結締組織（例如臍帶）的多能細胞；MSC具有自我更新和分化為間充質(zhì)組織的能力。除了它們的分化能力外，MSC還對許多疾病具有免疫調節作用。MSCs可以抑制活化的外周血單核細胞 (PBMC) 和T淋巴細胞的增殖，從而誘導調節性T細胞 (Treg) 分化并抑制T輔助細胞17 (Th17) 細胞功能; 正是通過(guò)這些機制，MSCs對RA發(fā)揮了免疫調節作用。MSC的免疫調節能力被認為取決于干擾素-γ (IFN-γ) 誘導的吲哚胺2,3-雙加氧酶 (IDO)。

間充質(zhì)干細胞獨特的免疫調節特性使其成為組織修復的有前途的候選細胞療法，有可能用于治療免疫疾病，如移植物抗宿主病 (GVHD) 和自身免疫性疾病，如系統性紅斑狼瘡 (系統性紅斑狼瘡); 然而，使用間充質(zhì)干細胞移植 (MSCT) 治療RA的結果相互矛盾，間充質(zhì)干細胞移植對同一疾病的臨床療效存在巨大的個(gè)體差異，但其原因尚不清楚。為了間充質(zhì)干細胞移植的廣泛臨床應用，需要更好地了解MSC的生物學(xué)特性。該信息將有助于闡明間充質(zhì)干細胞的移植免疫調節機制并提高臨床療效。

血清IFN-γ水平預測干細胞移植治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎的療效

間充質(zhì)干細胞移植治療活動(dòng)性類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎的療效研究

2018年，第三軍醫大學(xué)大坪醫院野戰外科研究所在國際雜志《Journal of Translational Medicine》上發(fā)布了一篇《血清 IFN-γ 水平預測間充質(zhì)干細胞移植對活動(dòng)性類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎的治療效果》的研究結果。

在這項研究中，我們旨在確定間充質(zhì)干細胞移植在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎患者中的不同臨床療效，并確定一種可能的血清生物標志物來(lái)預測間充質(zhì)干細胞移植的治療效果。

治療方案：患者被隨機分為MSCT組和對照組?；颊呓邮?×106個(gè)細胞/kg體重的50mL含1%白蛋白的生理鹽水作為治療，或接受50mL不含UCMSCs的含1%白蛋白的生理鹽水作為對照，通過(guò)靜脈輸注。如果患者的狀況繼續改善，則使用停藥時(shí)間表按以下順序逐漸減少常規藥物治療：醋酸潑尼松，然后是NSAID和DMARD。所有治療修改均由負責的風(fēng)濕病學(xué)家同意。

疾病狀態(tài)評估：所有患者在第1、2、3、4、12、24和48周時(shí)返回進(jìn)行預定的隨訪(fǎng)。在這些時(shí)間點(diǎn)檢查并記錄患者的不良事件、一般身體狀況、血清學(xué)指標和Treg/Th17細胞比值。在基線(xiàn)和每位患者的每次隨訪(fǎng)時(shí)評估28關(guān)節疾病活動(dòng)評分 (DAS28) 和健康評估問(wèn)卷 (HAQ)。

結果

安全評價(jià)

間充質(zhì)干細胞移植期間或之后未發(fā)生嚴重的急性不良事件。沒(méi)有患者發(fā)生移植物抗宿主?。℅VHD），也沒(méi)有發(fā)生嚴重感染。血常規、肝腎功能分析、胸片、尿液分析或心電圖均未發(fā)現明顯異常。

48周后，反應組 (n=28) 顯示血紅蛋白和白蛋白水平顯著(zhù)升高，血小板水平降低；這些發(fā)現表明免疫功能得到改善。

疾病活動(dòng)評估

間充質(zhì)干細胞移植后隨訪(fǎng)12周，MSCT組28例患者臨床癥狀迅速改善，疾病活動(dòng)度下降，藥物用量下降。 同時(shí)C反應蛋白 (CRP) 水平和紅細胞沉降率 (ESR) 的降低一致，反應組的HAQ和DAS28值在MSCT后12周顯著(zhù)降低。這些發(fā)現表明疾病狀況有所改善。此外，反應組中的大多數患者無(wú)需連續給藥即可維持這些治療效果長(cháng)達48周。然而，2名 (8%) 患者出現復發(fā)，表現為24周時(shí)ESR和CRP水平升高以及關(guān)節腫脹和疼痛。此外，在MSCT后反應組的23名患者成功逐步減少醋酸潑尼松劑量 。

血清學(xué)自身抗體譜發(fā)現

為了進(jìn)一步研究MSCT的治療效果，在MSCT前后檢測自身抗體，包括抗CCP和RF水平。反應組移植后抗 CCP和RF水平降低，但是，這些變化在統計上并不顯著(zhù)。

免疫功能

RA是一種病因不明的嚴重、進(jìn)行性、全身性炎癥性疾病。RA的發(fā)展與免疫系統疾病密切相關(guān)，免疫系統疾病主要歸類(lèi)為免疫穩態(tài)失衡。

進(jìn)一步的測試表明，與無(wú)反應組和對照組相比，反應組中 CD4+CD25+Foxp3+Tregs的百分比增加，CD4+IL-17A+Th17細胞的百分比降低（圖3C）。這些發(fā)現支持MSCs在調節免疫穩態(tài)中發(fā)揮重要作用。特別是，CD4+CD25+Foxp3+Treg與CD4+IL-17A+ Th17 細胞 (Treg/Th17) 的低比例表明免疫狀態(tài)不平衡和炎癥微環(huán)境過(guò)度。在MSCT前的所有患者中都觀(guān)察到這種低比率，但在MSCT后反應組中逐漸逆轉（圖3d)。

炎癥微環(huán)境

由于免疫狀態(tài)不平衡，RA患者的特征通常是促炎微環(huán)境，包括高水平的白細胞介素 (IL)-6和腫瘤壞死因子-α (TNF-α) 和低水平的IL-10。MSCT后，反應組患者的免疫平衡得到改善，表現為IL-6和 TNF-α 水平降低和IL-10水平增加。IL-6和TNF-α水平逐漸降低，而IL-10水平在4周時(shí)顯著(zhù)升高，然后在MSCT后逐漸降低至正常水平。然而，未觀(guān)察到IL-1β、IL-2R 和IL-8水平的顯著(zhù)變化。

IFN-γ預測間充質(zhì)干細胞移植對類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎患者的臨床反應

在我們的單一臨床研究中，同種異體間充質(zhì)干細胞移植的臨床反應率為54% (28/52)。

討論

在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎中可以發(fā)現骨髓間充質(zhì)干細胞數量的減少，并且這種減少隨著(zhù)疾病進(jìn)展變得更加嚴重。最近的研究表明，間充質(zhì)干細胞可以改善類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎患者和動(dòng)物模型的關(guān)節炎，并且間充質(zhì)干細胞的免疫抑制作用可能會(huì )被關(guān)閉甚至轉換為刺激作用。我們目前的研究證實(shí)了間充質(zhì)干細胞移植治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎患者的臨床安全性和有效性。然而，與研究設計一致，j的臨床療效差異很大。間充質(zhì)干細胞移植后12周，間充質(zhì)干細胞移植組中54%的患者獲得了良好或中等反應，而間充質(zhì)干細胞移植組中另外46%的患者沒(méi)有臨床反應。

靜脈輸注臍帶間充質(zhì)干細胞是一種安全有效的做法，可以提高免疫功能和血清學(xué)指標。除了通過(guò)DAS28值和HAQ評分評估的疾病活動(dòng)顯著(zhù)降低外，MSC輸注還逆轉了炎癥微環(huán)境并重新平衡了免疫系統。

在MSCT反應組中，獲得了臨床獲益的證據，臨床表現的改善可能與Treg/Th17比率增加有關(guān)，這導致炎癥細胞因子表達、ESR 和CRP水平降低。這些結果表明，抗炎以及改善的免疫調節和誘導的免疫耐受可能是MSCT的主要機制。然而，MSCs在體內的作用不是永久性的。在目前的研究中，8%的患者在先前的良好或中度反應后24周時(shí)疾病復發(fā)。疾病活動(dòng)指數，如ESR和CRP水平，略微恢復到基線(xiàn)水平，同時(shí)伴有復發(fā)性關(guān)節腫脹和疼痛。由于 MSC輸注在臨床應用中的安全性，部分復發(fā)的RA患者可能需要在6個(gè)月后再次輸注MSC。

結論

在本研究中，我們證明（1）同種異體間充質(zhì)干細胞移植是安全的，因為在間充質(zhì)干細胞移植期間或之后沒(méi)有觀(guān)察到嚴重的不良事件；

(2) 間充質(zhì)干細胞移植對部分類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節炎患者有效，DAS28值、HAQ評分、CRP水平和ESR的降低表明

(3) 間充質(zhì)干細胞移植改善了對治療有反應的患者的自身抗體譜；

(4)間充質(zhì)干細胞移植的潛在機制很可能是MSCs的抗炎或免疫調節作用，以及恢復免疫平衡和耐受性；

(5)血清IFN-γ水平可能是預測間充質(zhì)干細胞對RA患者治療效果的關(guān)鍵因素。